《植物生理学报》 2005, 41(4): 424-428

星星草 cDNA 文库构建和金属硫蛋白(MT-1)基因的克隆

刘桂丰* 褚延广 王玉成 侯英杰 杨传平

东北林业大学林学院林木遗传育种教研室，哈尔滨 150040

通信作者：刘桂丰；E-mail: liuguifeng@126.com；Tel: 0451-82190607

摘　要：

以受 NaHCO3 胁迫后的星星草叶片组织为材料构建了 cDNA 文库，文库的初始滴度为 2.0×106 pfu，重组率为 95%， 平均插入片段长度为 0.8 kb，扩增后文库的滴度为 4.0×109 pfu•mL-1。 文库克隆随机测序获得了星星草的金属硫蛋白(MT-1) 基因的全长 cDNA 序列，显示文库中含有一定量的全长基因。MT-1 基因全长 622 bp，其中 5' 非翻译区 57 bp，3' 非翻译 区 343 bp，开放读码框长 222 bp，编码 73 个氨基酸，氨基酸序列中具有植物 MT-1 蛋白特有的金属响应元件(MRE)序 列，MT-1 蛋白的分子量为 7.814 kD，理论等电点为 4.72。

关键词：星星草；cDNA 文库；NaHCO3 胁迫；金属硫蛋白

收稿：2004-10-08   修定：2004-12-28

资助：国家“973”计划(G1999016000)和国家转基因植物 研究与产业化专项(JY03A1802)。

星星草 cDNA 文库构建和金属硫蛋白(MT-1)基因的克隆

刘桂丰* 褚延广 王玉成 侯英杰 杨传平

东北林业大学林学院林木遗传育种教研室，哈尔滨 150040

Corresponding author: ; E-mail: liuguifeng@126.com; Tel: 0451-82190607

Abstract:

以受 NaHCO3 胁迫后的星星草叶片组织为材料构建了 cDNA 文库，文库的初始滴度为 2.0×106 pfu，重组率为 95%， 平均插入片段长度为 0.8 kb，扩增后文库的滴度为 4.0×109 pfu•mL-1。 文库克隆随机测序获得了星星草的金属硫蛋白(MT-1) 基因的全长 cDNA 序列，显示文库中含有一定量的全长基因。MT-1 基因全长 622 bp，其中 5' 非翻译区 57 bp，3' 非翻译 区 343 bp，开放读码框长 222 bp，编码 73 个氨基酸，氨基酸序列中具有植物 MT-1 蛋白特有的金属响应元件(MRE)序 列，MT-1 蛋白的分子量为 7.814 kD，理论等电点为 4.72。

Key words: 星星草；cDNA 文库；NaHCO3 胁迫；金属硫蛋白